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wb实验步骤及原理 实验原理怎么写

2024-05-01 1801 明贵知识网

Western Blot 实验原理


WB 是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。


Western Blot 分类


根据显色方法主要有以下几种：


放射自显影


底物化学发光 ECL


底物荧光 ECF


底物 DAB 呈色


现在常用的有底物化学发光 ECL 和底物 DAB 呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，目前发表文章通常是用底物化学发光 ECL。只要买现成的试剂盒就行， 操作也比较简单，原理如下（二抗用 HRP 标记）：反应底物为过氧化物 + 鲁米诺，如遇到 HRP，即发光，可使胶片曝光，就可洗出条带。

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